電影《300勇士:帝國崛起》的主要演員包括:
蘇利文·斯坦普萊頓(Sullivan Stapleton),飾演特米斯托克列斯(Themistocles)。
羅德里格·桑托羅(Rodrigo Santoro),飾演薛西斯(Xerxes)。
伊娃·格林(Eva Green),飾演阿特米西亞(Artemisia)。
安德魯·普利文(Andrew Pleavin),參與演出。
傑克·奧康奈爾(Jack O'Connell),飾演卡里斯托(Calisto)。
琳娜·海蒂(Lena Headey),在電影中飾演斯巴達王後。
此外,還有多位演員參與了電影的演出,包括安德魯·蒂曼(Andrew Tiernan)、卡蘭·穆爾韋(Callan Mulvey)、Yigal Naor、阿希拉夫·巴姆(Ashraf Barhom)、Vincent Walsh、史蒂文·克瑞(Steven Cree)、Peter Ferdinando、Andrei Claude、Trayan Milenov-Troy、George Georgiou、Christopher Sciueref、漢斯·麥瑟遜(Hans Matheson)、Wayne Dalglish、Ben Turner、朱利安·斯通(Julian Stone)等。