7AAD（7-氨基放線菌素D）染色原理
7AAD，全稱為7-aminoactinomycin D，是一種能夠染色核酸的遠紅外螢光探針。它與碘化丙啶（PI）類似，是一種非細胞膜通透性的螢光染料，通常不能透過具有生物活性的細胞膜。因此，它主要染色喪失細胞膜完整性的壞死細胞或經過固定和通透處理後的細胞。在細胞或組織中，7AAD染色DNA後的最大激發光波長為546nm，最大發射光波長為647nm。
在細胞凋亡的過程中，磷脂醯絲氨酸（PS）會從細胞膜內側翻轉到細胞膜表面，暴露在細胞外環境中。Annexin V是一種與PS有高親和力的磷脂結合蛋白，可以與標記有螢光素的Annexin V探針一起使用，通過流式細胞儀或螢光顯微鏡檢測細胞凋亡。
7AAD與PI一樣，不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞中，細胞膜的通透性增加，允許這些染料進入細胞核染色。7AAD的螢光信號被PerCP通道接收，因此它與PerCP或PE-Cy5偶聯的抗體不能共同標記樣品細胞。
在流式細胞術中，7AAD可以代替PI染料用於標記死細胞。它的螢光信號較為集中，通常被PerCP螢光通道接收，與FITC和PE發射的螢光不重疊，因此可以與FITC和PE共同標記。7AAD不需要與其他螢光素偶聯抗體同時標記，只需在流式上樣前5分鐘加入適量的7AAD於流式管中即可。
綜上所述，7AAD染色原理主要涉及它對DNA的遠紅外螢光染色能力，以及它在細胞凋亡和壞死過程中的特殊套用。通過與Annexin V等探針的結合使用，可以更準確地檢測和分析細胞的凋亡狀態。