DAB(3,3'-二氨基聯苯胺)染色是一種常用的免疫組化染色方法,其原理基於過氧化酶的催化作用。具體來說:
過氧化酶催化反應:細胞內的過氧化酶(如辣根過氧化物酶HRP)能夠催化過氧化氫(H2O2)分解,釋放出氧。
DAB氧化:DAB作為顯色底物,在過氧化氫的存在下被氧化,失去電子。
顏色變化和沉澱:氧化的DAB形成棕褐色不溶性產物,並在原位沉澱,形成可觀察的金黃色或棕褐色沉澱。
套用:DAB染色不僅用於免疫組化,還廣泛套用於原位雜交、斑點印跡和Western印跡等實驗中。
注意事項:DAB具有致癌作用,操作時應戴手套,儘量避免與皮膚接觸。