Loading buffer的主要作用如下:
顯示電泳進程。Loading buffer中含有指示劑,如溴酚藍和二甲苯氰FF,這些指示劑可以幫助觀察電泳的進行程度,便於適時終止電泳。
增大樣品密度。Loading buffer中的甘油成分可以增加樣品的密度,使其密度大於TAE,從而幫助樣品沉降到點樣孔中,防止樣品在電泳過程中飄出點樣孔。
促使聚合酶變性。在某些Loading buffer中含有的SDS(十二烷基硫酸鈉)可以促進聚合酶變性,防止未完全除盡的聚合酶結合在DNA雙鏈上,影響其遷移速率。
保護蛋白質結構。在western blot中,loading buffer可能包含巰基乙醇等還原劑,以確保蛋白質充分變性並保護其結構。
維持蛋白質的線性狀態。Loading buffer中的成分可以幫助保持蛋白質的線性狀態和攜帶過量的負電荷,這對於確保電泳過程中的正確行為是必要的。
以上作用共同確保了電泳實驗的準確性和可靠性。