PCR(聚合酶鏈反應)檢測的流程通常包括以下幾個步驟:
樣本採集。根據試劑盒說明書的要求,採集患者的樣本。常用的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等。採集樣本時,應使用無RNA酶的拭子和儲存管,以避免RNA的降解。
樣本保存與轉運。獲得樣本後,需儘快進行檢測。若無法立即檢測,應按照試劑盒說明書的指示,將樣本進行低溫封裝後送往專門的檢測機構。
核酸提取。在檢測機構,首先需要對樣本進行核酸提取。這一步驟需要使用指定的核酸提取試劑盒。
逆轉錄與擴增檢測。病毒RNA需要首先逆轉錄爲cDNA,然後通過PCR技術進行擴增檢測。這一步驟使用熒光定量PCR儀進行,通過檢測樣本的Ct值(循環閾值),可以判斷樣本中是否含有特定的病毒。
結果判讀。根據PCR儀提供的數據,解讀樣本中是否含有目標病毒。這通常涉及到對Ct值的判斷。
整個過程中,樣本的採集、保存、轉運、核酸提取、逆轉錄、擴增檢測以及結果判讀等步驟,都必須嚴格按照試劑盒說明書的要求進行,以確保檢測的準確性和可靠性。