SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳)是一種常用的電泳技術,主要用於分離蛋白質。其原理如下:
在樣品和凝膠中加入SDS(十二烷基硫酸鈉)和還原劑(如巰基乙醇或二硫蘇糖醇)。SDS是一種陰離子去污劑,能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使蛋白質分子去摺疊,破壞其二級和三級結構。還原劑則能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。這樣,蛋白質分子解聚成多肽鏈,解聚後的胺基酸側鏈和SDS結合成蛋白-SDS膠束。由於SDS與蛋白質的結合是按重量成比例的,因此消除了不同蛋白質分子間的電荷差異和結構差異。
在聚丙烯醯胺凝膠中,蛋白質根據其分子量的大小進行分離。聚丙烯醯胺凝膠具有分子篩效應,能夠根據分子大小不同而分離蛋白質。
總的來說,SDS-PAGE通過使用SDS和還原劑使蛋白質解聚和帶負電荷,然後在聚丙烯醯胺凝膠中根據分子量的大小進行分離,這樣蛋白質就根據其分子量在電場中移動,從而實現分離。