Smith降解是一種化學分析方法,主要用於研究多糖的結構。該方法包括以下步驟:
高碘酸氧化:首先,對多糖進行高碘酸氧化,生成多糖醛。
還原反應:接著,使用硼氫化合物(如硼氫化鉀或硼氫化鈉)將多糖醛還原成穩定的多羥基化合物。這一步在室溫下攪拌18至24小時。
酸水解:然後,將還原後的產物進行適度酸水解,通常使用1 mol/L的硫酸在100℃下水解8小時。
產物鑑定:水解後的產物通過紙層析方法進行鑑定,以推斷多糖各組分的連線方式及次序。
Smith降解的具體操作包括:
將高碘酸氧化後的溶液經過乙二醇處理,並對流水透析48小時,蒸餾水透析24小時。
減壓濃縮至10ml左右,加入硼氫化鉀,室溫下攪拌18至24小時。
用0.1 mol/L醋酸中和至pH 6至7,再次對流水透析48小時,蒸餾水透析24小時。
減壓蒸乾後,加入1 mol/L硫酸2ml,封管,100℃水解8小時。
水解後用碳酸鋇粉末中和,定量濾紙過濾。
濾液減壓濃縮後,通過紙層析方法檢測。
通過上述步驟,Smith降解可以幫助科學家了解多糖的結構,包括單糖的組成、連線方式以及糖苷鍵的類型。