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trizol原理

Trizol試劑的原理是利用苯酚、異硫氰酸胍等成分來裂解細胞,使核蛋白體解離,從而分離RNA與蛋白質,並釋放RNA到溶液中。以下是詳細步驟:

加入氯仿後,Trizol會促使RNA進入水相,而蛋白質和DNA留在有機相中。

通過離心,樣品分為水樣層和有機層,RNA存在於水樣層中。

收集水樣層後,可以使用異丙醇沉澱RNA。

去除水樣層後,樣品中的DNA和蛋白質可以通過乙醇沉澱從有機層中分別析出。

此外,Trizol試劑中還含有其他成分,如β-巰基乙醇和8-羥基喹啉,這些成分有助於抑制RNA酶的活性,進而保護RNA不受降解。