Western 煮蛋白是一種常用的蛋白質分析技術,其過程和目的如下:
過程:
使用高溫處理,目的是使SDS(十二烷基硫酸鈉)與蛋白質充分結合。
這種結合導致蛋白質完全變性和解聚,形成棒狀結構,並使整個蛋白帶上負電荷。
SDS能夠斷開分子內和分子間的氫鍵,破壞蛋白質分子的二級和三級結構,使得蛋白質僅根據分子量大小的不同在凝膠電泳中遷移速度不同,從而排除了因空間結構不同所造成的誤差。
高溫處理還有助於滅活蛋白酶,防止蛋白質在處理過程中被降解。
目的:
Western 煮蛋白主要用於蛋白質的定量、純度鑑定以及蛋白質分子量的測定。
通過與抗體探針的結合,可以進一步分析特定蛋白質的存在和表達水平。
通過上述過程,Western 煮蛋白技術為生物醫學研究提供了關於蛋白質的重要信息,特別是在蛋白質組學和信號轉導等領域有著廣泛的套用。