親和層析（affinity chromatography）是一種利用生物分子間的專一性親和力進行分離的層析技術。
親和層析基於配體和目標分子之間的特異性結合，這種結合通常是可逆的，可以通過改變流動相條件來使二者分離。親和層析廣泛應用於蛋白質、酶、抗體、抗原以及其他生物大分子的分離和純化，具有高分辨率和快速簡單的特點。此外，親和層析還可用於某些生物大分子結構和功能的研究。
親和層析的具體應用包括但不限於：
凝集素親和層析用於分離糖複合物。
酶聯免疫吸附試驗（ELISA）中用於檢測抗體和抗原的結合。
親和層析的固定相通常是由配體和共價結合的不溶性基質構成，這種結合方式可以維持配體活性，減少非特異性結合，從而提高分離的特異性。