《仁王》二周目與一周目的主要區別有以下幾個方面：
敵人變化。二周目中，敵人的血量和傷害會有所提升，部分敵人會獲得新的能力或變化，例如，一些使用弓箭或火槍的敵人可能會換成使用大炮。
裝備變化。二周目允許玩家開始刷取綠色裝備，這些裝備的屬性比一周目的裝備要好很多。
怪物招式增加。二周目中，怪物的招式會變得更加複雜和強力，同時怪物的血量也會大幅增加，提升了挑戰難度。
神器和守護靈強化。二周目中，敵人可能會掉落神器，並且遊戲中引入了神器的概念，玩家可以通過分解神器裝備或武器獲得神器的碎片，用於鍛造更強大的神器。此外，所有守護靈都可以在神社中強化，每個守護靈最高可以升級到LV30，專屬能力也會相應強化。
任務和難度變化。二周目引入了「強者之道」任務，這些任務從第三章開始逐步解鎖，玩家可以通過供奉「酒盅」來提升神器掉落率。此外，二周目還可以直接在地圖上開啟新的難度，玩家可以獲得新的角色外觀。
這些變化顯著提升了遊戲的挑戰性，為玩家提供了更豐富的遊戲體驗。