反式脂肪酸的形成主要有天然來源和人為加工兩種方式。以下是兩種方式的介紹：
天然來源。反式脂肪酸在天然食物中存在，如牛、羊等反芻動物的脂肪組織和乳製品中，含有少量的反式脂肪，這些反式脂肪是由於飼料中部分不飽和脂肪酸在動物胃中經過細菌的氫化作用而形成的。
人為加工。在食品工業中，反式脂肪酸主要來源於植物油的氫化過程和食品加工，氫化過程可以增加植物油的飽和度，使其由液態轉變為半固態或固態，從而具有更好的塑性和口感，常用於製作起酥油和人造奶油，此外，在植物油精煉脫臭過程中，也會產生反式脂肪，特別是在高溫烹飪過程中，植物油中的順式脂肪在光、熱和其他催化劑的作用下，可能會部分轉變為反式脂肪。