使用手套箱時，需要注意以下幾點：
日常維護和保養。保持手套箱內外清潔，定期檢查水、氧含量和設備耗氣量，確保氣體壓力充足；每日記錄這些數據；定期更換工作氣鋼瓶內的氣體。
從手套箱內取出樣品。使用小過渡艙，在放入或取出樣品前，確保過渡艙內的壓力表指針在零位置；若非零，需先抽真空再操作；使用真空泵，將樣品放入或取出後，關閉過渡艙門，並使用腳踏開關升壓維持壓力穩定。
手套和過渡艙的維護。使用手套時，避免佩戴可能刺破手套的尖銳物品；定期檢查手套是否有破損，及時更換；檢查過渡艙密封圈是否破損，必要時更換。
清洗和維護。調節減壓閥門保持箱體壓力在0.5mbar以上，防止空氣倒流；清洗過程中關閉觸控螢幕上的清洗開關，避免壓力過大損壞氣動閥門；清洗超出正常時間或用氣量，需重新檢漏或聯繫售後工程師。
特殊注意事項。未經培訓人員不得擅自使用手套箱；使用過程中，若手套箱內壓力異常，應立即停止操作並檢查原因。