草酸可以通過多種方法進行工業規模的生產。以下是一些主要的生產方法：
甲酸鈉法。首先，一氧化碳在加壓條件下與氫氧化鈉反應生成甲酸鈉。然後，甲酸鈉在高溫下脫氫生成草酸鈉。最後，草酸鈉經過鈣化、酸化、結晶和脫水乾燥等工序處理，得到草酸。
氧化法。以澱粉或葡萄糖為原料，在催化劑存在下，與硝酸-硫酸進行氧化反應生成草酸。
羰基合成法。一氧化碳經過提純後，在鈀催化劑存在下與丁醇發生羰基化反應，生成草酸二丁酯。然後通過水解得到草酸。
乙二醇氧化法。以乙二醇為原料，在硝酸和硫酸存在下，用空氣氧化生成草酸。
丙烯氧化法。通過丙烯的硝酸氧化或混酸氧化得到草酸。
除了上述方法外，還有一些傳統的生產方法，如使用木屑和強鹼共熔製取草酸鹽，再經酸化得到草酸。這些方法因環保和效率問題已逐漸被淘汰的方法所替代。
在實驗室中，草酸的製備可以通過蔗糖與濃縮硝酸溶液反應來實現。此外，還有一些方法可以通過化學反應將草酸作為副產品或中間體合成，例如通過硝酸氧化反應。