血塗片的製作過程主要包括以下幾個步驟:
準備血液樣本。通常使用新鮮的全血,可以從靜脈或毛細血管採集,也可以使用EDTA抗凝的血樣。
清潔載玻片。確保載玻片乾淨、無油膩和無劃痕,新的載玻片可能需要用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時,使用過的載玻片可以用肥皂水煮沸清潔。
塗抹血液。用毛細吸管吸取少量血液(通常是5~7微升),輕輕滴加在載玻片的一端。使用推片(如蓋玻片或專門的塗片推片),與載玻片形成約30度至45度的角度,平穩地將血液推向另一端,確保血液在載玻片上形成一層薄而均勻的單層細胞。這個過程中需要注意血液的用量、推片的角度和速度,以製作出標準血塗片。
固定和染色。血液塗抹後,讓其稍微晾乾,然後放入甲醇或其他固定液中固定約15分鐘。固定後,通常使用瑞氏染液進行染色,染色過程中要注意時間和比例,確保染色均勻。
沖洗和乾燥。用清水輕輕沖洗掉多餘的染液,用吸水紙吸去多餘水分,然後讓血塗片自然乾燥。
鏡檢。最後,在顯微鏡下觀察血塗片,進行細胞形態學檢查。
這個過程要求一定的技巧和練習來製作高質量的血塗片。