配製DTT溶液的方法有多種,具體步驟取決於所需的DTT濃度和實驗要求。以下是一種常見的配製方法:
準備所需材料:DTT、蒸餾水、洗滌劑(如Triton X-100),如果需要使用含洗滌劑的DTT溶液。
計算DTT的量:根據所需的DTT濃度,計算出所需的DTT質量。例如,對於1mol/L的DTT溶液,可以使用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT。
溶解DTT:將計算出的DTT質量加入到適量的蒸餾水中,使用磁力攪拌器攪拌均勻,確保DTT充分溶解。
調整pH值:使用pH試紙或pH計測量溶液的pH值,並根據需要調整到所需的pH範圍內。
過濾除菌:如果需要無菌的DTT溶液,可以通過過濾的方式除去雜質和細菌。
分裝儲存:將配製好的DTT溶液分裝成小份,貯存於適當的溫度下,如-20℃。
注意事項:
如果使用的是毫克級小包裝的DTT,通常不需要稱量分裝,可以直接在原瓶中溶解配成儲存液。
DTT的推薦溶劑是DMSO,但在配製儲存液時,應注意最大濃度限制,例如只能配成129.38mM的儲存液。
在配製大體積的DTT溶液時,應考慮溶液的體積和濃度,以確保實驗需求得到滿足。
以上步驟提供了一個基本的框架來配製DTT溶液。具體的步驟和材料可能會根據實驗的具體要求和實驗室的條件有所不同。