LC-MS/MS(液相色譜-串聯質譜)技術結合了液相色譜(LC)和串聯質譜(MS/MS)的優勢,廣泛套用於複雜樣品分析,如蛋白質組學和代謝組學。該技術的基本原理如下:
樣品首先通過液相色譜系統進行分離。這一步利用多肽或蛋白質在液相中的不同相互作用,如反相、離子交換或親和色譜,將它們分離成單個組分。
分離後的多肽或蛋白質進入質譜儀進行檢測。在質譜部分,樣品被離子化,形成的離子根據它們的質荷比(m/z)進行分離。這一過程中,離子通常會在質量分析器中經歷碰撞誘導解離(CID),產生碎片離子。
串聯質譜(MS/MS)分析這些碎片離子。在第一級質譜(MS)中,前體離子被選擇並進入碰撞室進行碎裂。在第二級質譜(MS/MS)中,分析這些碎片離子,通過對比這些碎片離子的質譜圖與已知資料庫中的肽序列,可以鑑定原始的多肽或蛋白質。
數據分析。通過專門的軟體對質譜數據進行解析和定量,可以得到多肽的序列信息和相對豐度,進而用於蛋白質鑑定和定量分析。
LC-MS/MS技術的優點包括高靈敏度、出色的分離能力和對大分子的有效分析。這些特點使得LC-MS/MS成為研究生物標記物、藥物代謝和蛋白質相互作用等領域的重要工具。