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phosphate buffer配方

磷酸鹽緩衝液(PBS)的配方如下:

成分:

NaCl(氯化鈉):137mmol/L

KCl(氯化鉀):2.7mmol/L

Na2HPO4(磷酸二氫鈉):4.3mmol/L

KH2PO4(磷酸二氫鉀):1.4mmol/L

配製方法:

稱取7.9g NaCl、0.2g KCl、0.24g KH2PO4(或1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶於800ml蒸餾水中。

用HCl調節溶液的pH值至7.4。

最後加蒸餾水定容至1L。

保存於4℃冰櫃中。

注意事項:

通常所說的濃度0.01M指的是緩衝溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na離子或K離子的濃度。Na離子和K離子只是用來調節滲透壓的。

母液配製:0.2M Na2HPO4和0.2M NaH2PO4,用於配製不同濃度的PBS。

各種濃度PB(pH=7.4)的配製:先配0.2M PB (pH=7.4, 100ml),取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L的Na2HPO4。然後只需將0.2M PB (pH=7.4)按相應比例適當稀釋即可,例如:0.1M PB (PH=7.4) :取500ml 0.2M PB,加水稀釋至1000ml即可。0.01M PB (PH=7.4) :取50ml 0.2M PB,加水稀釋至1000ml即可。0.02M PB (PH=7.4) :取100ml 0.2 M PB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。