Western Blot是一種常用的生物實驗技術，主要用於蛋白質的分析和檢測。其原理和步驟如下：
原理。Western Blot利用SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)來分離蛋白質樣品，其中SDS使蛋白質帶負電，從而在電場作用下遷移，根據蛋白質分子量的大小不同，它們在凝膠中的遷移速度也會不同。分離後的蛋白質被轉移到固相支持體（如硝酸纖維素膜或PVDF膜）上，這一過程稱為轉印，然後通過特異性抗體識別目標蛋白質，抗體可以是未標記的（一抗）或與酶（如辣根過氧化物酶）或同位素標記的第二抗體結合，最終通過化學顯色或放射自顯影來檢測特定的蛋白質條帶。
步驟。提取蛋白質樣品；製備SDS-PAGE凝膠並進行電泳；將凝膠上的蛋白質轉移到固相支持體上；封閉支持體上的非特異性結合位點；與一抗（特異性抗體）反應；與二抗（通常與酶或同位素標記）反應；最後通過ECL顯影或其他顯色方法檢測目標蛋白質。
Western Blot廣泛套用於分子生物學、生物化學、免疫遺傳學等領域，用於研究蛋白質的表達、定位、翻譯後修飾等。