Western blotting（WB）是一種用於檢測特定蛋白質的生物化學技術，其基本原理如下：
電泳分離蛋白質。首先，利用聚丙烯醯胺凝膠電泳（PAGE）技術分離蛋白質樣品。在凝膠中，蛋白質根據其大小和電荷差異被分離。
蛋白質轉移。接著，通過電泳分離的蛋白質從凝膠轉移到固相載體（如硝酸纖維素薄膜或PVDF膜）上。這一過程稱為轉膜，蛋白質以非共價鍵的形式吸附到固相載體上，這樣不會改變蛋白質的生物活性。
免疫反應。在固相載體上的蛋白質作為抗原，與特異性抗體（一抗）發生免疫反應。這些抗體通常針對蛋白質的特定表位，如特定的肽序列或蛋白質結構域。
標記的二抗。然後，與酶或同位素標記的第二抗體（二抗）反應。二抗特異性識別一抗的結合位點，通過底物顯色或放射自顯影檢測結合的抗體，從而間接檢測特定蛋白質的存在。
Western blotting技術廣泛套用於生物學和醫學研究中，用於檢測特定蛋白質的表達水平、鑑定蛋白質的分子量、分析蛋白質的翻譯後修飾等。