甲基化是一種重要的化學修飾過程,廣泛存在於生物系統中,主要包括DNA甲基化和蛋白質甲基化兩種形式。在生物系統內,甲基化是經酶催化的,涉及重金屬修飾、基因表達的調控、蛋白質功能的調節以及核糖核酸加工。
以下是甲基化方法的套用:
蛋白質甲基化。蛋白質甲基化通常涉及精氨酸或賴氨酸的甲基化,對基因表達有表觀遺傳影響。蛋白質甲基化分析方法包括高效液相串聯質譜法和抗體法,這些方法可以鑑定蛋白質的甲基化水平、位點。
DNA甲基化。DNA甲基化是調控基因表達和維持基因組穩定性的重要機制。常用的DNA甲基化檢測方法有重亞硫酸鹽轉化法、甲基化特異性PCR(MS-PCR)、亞硫酸氫鹽處理加測序、聯合亞硫酸氫鈉的限制性內切酶分析法(COBRA)和螢光定量法(Methylight)。這些方法各有優劣,適用於不同的研究需求和樣本類型。
此外,還有Hakomari-Ciucanu-Needs法,這是一種化學甲基化方法,適用於多糖的甲基化。每種方法都有其特定的套用場景和限制,因此選擇合適的方法對於實現有效的甲基化分析至關重要。