蟻后的交配過程通常涉及飛行尋找伴侶。蟻后在出生時是有翅膀的，這些翅膀用於飛行，以便尋找雄性伴侶。在交配完成後，蟻后會降落地面並開始繁殖形成蟻群。蟻后在其一生中只交配一次，婚飛後體內即儲存了足夠的精子，因此不需要與其他雄蟻交配。這些精子隨後與體內成熟的卵細胞受精。
在交配過程中，蟻王會跟隨蟻后，通過觸角碰觸蟻后的身體來探測費洛蒙。兩隻螞蟻會一起尋找新的巢穴，最終呈「一」字型進行交配。在交配中，兩隻白蟻可能會微微顫抖，1-2分鐘後交配結束。交配結束後，雄蟻可能會幫助雌蟻清理屁股，整個過程中，它們可能會互相舔拭翅膀、頭部和腹部。
年輕的蟻后在完成交配後，可能會折斷翅膀回到原先的蟻群產卵，或者開闢自己的新王國。蟻后之所以在螞蟻種群中擁有無上的地位，是因為她要忍受無數的艱辛，生下所有的臣民。她的身上有一個儲精囊，只需交配一次，就可以終生產卵。