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hplc方法

高效液相色譜法HPLC)是一種在20世紀60年代後期發展起來的分析方法,適用於大約80%的有機化合物分析和測定。HPLC基於經典液相色譜法,並結合了氣相色譜的理論,具有以下主要特點:

高壓。HPLC使用高壓輸送系統,最大輸送壓力可達29.4MPa,這是因為液體流動相在通過色譜柱時會受到較大阻力。

高速。與經典液相色譜法相比,HPLC的流動相在柱內的流速更快,通常在1至10ml/min的範圍內,這使得分析時間大大縮短。

高效。HPLC的分離效率高於傳統液相色譜法,其柱效可由每米塔板數來表示,每米可達幾萬或幾十萬。

高靈敏度。HPLC採用高靈敏度的檢測器,如螢光檢測器的靈敏度可達10-11g,顯著提高了分析的靈敏度。

HPLC系統主要由高壓泵、色譜柱、檢測器和數據處理系統組成。色譜柱是關鍵部分,採用小粒徑的填料以增加柱效。流動相和固定相是HPLC分離過程中的兩個關鍵因素。流動相是液相色譜中的輸送介質,而固定相則是色譜柱中的靜止相。HPLC的廣泛套用得益於其高效、快速、高靈敏度和高解析度的特點。