NBT染色方法適用於不同的樣本類型,如精液、植物幼苗、手指血等。以下是基於不同樣本類型的NBT染色方法:
精液標本。將新鮮精液標本完全液化後,測試精子濃度,以每毫升10%的比例加入約10^6個精子至反應小管中。加入100μL的NBT溶液並充分混勻。補充緩衝液至管體紅色刻度線處,混合小管後放入37攝氏度水浴中反應30分鐘,觀察顏色變化。
植物幼苗或根尖。準備NBT工作液,將50mg NBT溶解於100mL Tris緩衝液(pH 7.4)中,避光保存於4℃。採集植物樣本,用純水洗淨後吸乾水分。將樣本浸入NBT工作液中,常溫避光染色2~6小時,觀察顏色變化。
手指血。在載玻片上滴加20~30μL肝素溶液,取約40~60μL手指血與肝素混勻。加入一滴NBT溶液,混勻後置於37℃恆溫箱孵育15分鐘,再在室溫放置15分鐘。製作血塗片並自然晾乾。用瑞氏-吉姆薩染液進行染色,具體步驟為滴加染液、沖片、風乾。
這些方法展示了NBT染色的多樣性和其在不同領域中的套用,包括生物學、醫學等。